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기기분석

HPLC 컬럼 종류

by 히박사 2024. 3. 11.

HPLC(High-Performance Liquid Chromatography)의 정지상인 컬럼은 분석 대상 물질의 분리와 정제에 중요한 역할을 합니다. 다양한 종류의 정지상 컬럼이 있으며, 각각의 특성에 따라 다양한 물질을 분석할 수 있습니다. 이제 주요한 종류의 정지상 컬럼과 그 특징을 살펴보겠습니다.

 


1. Reverse Phase (역상) 컬럼



특징: Reverse Phase 컬럼은 가장 일반적으로 사용되는 정지상 중 하나입니다. 정지상으로는 수용성이 높은 극성 정지상이 사용되며, 역상 용매로는 물 대신 유기 용매가 사용됩니다. 이러한 특성으로 인해 극성 물질들이 분리되며, 다양한 화합물을 분석할 수 있습니다.
분석 가능한 물질: 지방족 화합물, 아미노산, 당류, 약물 등 다양한 물질을 분석할 수 있습니다.
대표적인 모델: C18(Octadecyl silane), C8, C4 등이 있으며, Agilent Eclipse, Waters XBridge, Phenomenex Luna 등이 대표적인 모델입니다.

 


2. Normal Phase (정상) 컬럼



특징: Normal Phase 컬럼은 역상 컬럼과는 반대로 정지상으로는 수용성이 낮은 극성 정지상이 사용되며, 정상 용매로는 극성 용매가 사용됩니다. 이러한 특성으로 인해 극성 물질들이 분리되며, 다양한 화합물을 분석할 수 있습니다.
분석 가능한 물질: 지방족 화합물, 테르펜, 에테르, 천연 화합물 등 극성 물질을 분석할 수 있습니다.
대표적인 모델: Silica gel, Alumina 등이 사용되며, Agilent ZORBAX Normal Phase, Waters Atlantis Silica 등이 대표적인 모델입니다.

 


3. Ion-Exchange (이온교환) 컬럼



특징: 이온교환 컬럼은 이온화된 화합물을 분리하는 데 사용됩니다. 정지상으로는 이온교환체가 사용되며, 역상 또는 정상 용매를 사용하여 화합물을 분리합니다.
분석 가능한 물질: 이온화된 화합물, 이온교환체 등을 분석할 수 있습니다.
대표적인 모델: Agilent ZORBAX Ion-Exchange, Waters Ion-Exchange 등이 대표적인 모델입니다.

 


4. Size Exclusion (크기 배제) 컬럼



특징: 크기 배제 컬럼은 분석 대상 물질의 분자 크기에 따라 분리하는 데 사용됩니다. 정지상으로는 고분자 구형 정지상이 사용되며, 정상 용매로는 비극성 용매가 사용됩니다.
분석 가능한 물질: 고분자, 단백질, 폴리머 등의 분석에 적합합니다.
대표적인 모델: Agilent Bio SEC, Phenomenex BioSep-SEC 등이 대표적인 모델입니다.

 


5. Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography (HILIC) 컬럼



특징: HILIC 컬럼은 역상과 유사하지만, 정상 용매로는 극성 용매를 사용합니다. 이러한 특성으로 인해 극성 물질들이 분리되며, 특히 당류 및 폴라 화합물을 분석하는 데 유용합니다.
분석 가능한 물질: 당류, 폴라 화합물, 약물 대사물 등을 분석할 수 있습니다.
대표적인 모델: Waters BEH Amide, Agilent AdvanceBio Glycan Mapping 등이 대표적인 모델입니다.

 


6. Chiral 컬럼



특징: Chiral 컬럼은 이성질체 분리에 사용되는 컬럼으로, 키랄 화합물의 입체적인 구조를 분리합니다.
분석 가능한 물질: 키랄 화합물 및 이성질체를 분석할 수 있습니다.
대표적인 모델: Chiralpak, Chirobiotic, Astec CHIRAL 등이 대표적인 모델입니다.

 


7. Affinity 컬럼



특징: Affinity 컬럼은 생물학적 결합 물질 간의 상호 작용을 기반으로 분석을 수행합니다. 특정 단백질, 항체 또는 다른 생물 분자와의 상호 작용을 분석할 수 있습니다.
분석 가능한 물질: 단백질, 항체, 리간드 등의 상호 작용을 분석할 수 있습니다.
대표적인 모델: Agilent Protein A, Protein G 등이 대표적인 모델입니다.

 


8. Polar 컬럼



특징: Polar 컬럼은 높은 극성을 가진 물질을 분석하는 데 사용됩니다. 정지상은 비극성이며, 역상 용매는 극성 용매를 사용합니다.
분석 가능한 물질: 폴라 화합물, 화장품 성분 등을 분석할 수 있습니다.
대표적인 모델: Waters Acquity HSS T3, Phenomenex Luna NH2 등이 대표적인 모델입니다.


이러한 다양한 종류의 정지상 컬럼은 분석하고자 하는 물질의 특성과 분리 방법에 따라 선택되어 사용됩니다. 정지상 컬럼의 선택은 분석의 정확성과 효율성에 큰 영향을 미치므로, 적절한 컬럼을 선택하는 것이 중요합니다. 분석 대상 물질의 특성을 고려하여 적절한 컬럼을 선택하고, 최적의 분석 조건을 설정하여 정확한 분석 결과를 얻을 수 있습니다.

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